水貂肠道内乳酸菌16s rdna的扩增及重组质粒的转化论文).doc

题目 I
摘要及关键词 I
1 前 言 1
1.1 水貂的概况 1
1.2 乳酸菌的研究近况 1
1.2.1 肠内乳酸菌的功能 1
1.2.1.1 促进机体对营养物质的吸收 1
1.2.1.2 提高肠粘膜免疫机能 1
1.2.1.3 抑制炎症性肠疾病 2
1.2.2 影响外源乳酸菌在肠内定植的因素 2
1.3 研究的目的和意义 2
2 材料和方法 2
2.1 材料 2
2.1.1 实验动物及肠内容物获取 2
2.1.2 主要试剂和药品 2
2.1.3 主要仪器 2
2.2 试验方法 3
2.2.1 水貂肠内细菌总DNA的提取 3
2.2.2 粗提DNA纯度的检测 3
2.2.3 粗提DNA琼脂糖凝胶电泳检测及纯化 3
2.2.4 PCR扩增及产物的纯化 4
2.2.5 纯化DNA的重组（目的DNA与载体连接） 4
2.2.6 Top10感受态细胞的制备 4
2.2.6.1 方法简介 5
2.2.6.2 具体步骤 5
2.2.6.3 转化率检测 5
2.2.7 重组DNA的转化………………………………………………………………………………………………………………….5
2.2.8 阳性克隆的筛选 5
3 结果与分析 5
3.1 粗DNA纯度检测 6
3.2 粗提DNA的电泳鉴定 6
3.3 PCR扩增结果及产物纯化 8
3.4 感受态细胞转化率检测 9
3.5 阳性克隆筛选 10
4 讨 论 10
5 结 论 11
参考文献 11
致 谢 13
附录………………………………………………………………………………………………………...14